Kadalasan, Lokasyon at Kalikasan ng Mga Insertions ng AAV Vector Pagkatapos ng Pangmatagalang Pagsunod-sunod ng Paghahatid ng FVIII Transgene sa isang Hemophilia A Dog Model
Mga Highlight Mula sa ISTH 2020 Virtual Congress

Kadalasan, Lokasyon at Kalikasan ng Mga Insertions ng AAV Vector Pagkatapos ng Pangmatagalang Pagsunod-sunod ng Paghahatid ng FVIII Transgene sa isang Hemophilia A Dog Model

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 at David Lillicrap1

1Kagawaran ng Patolohiya at Molecular Medicine, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, USA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Alemanya.

3Mga Serbisyo sa Pangangalaga ng Mga Hayop, University of Queen, Kingston, Ontario, Canada.

Mga Pangunahing Mga Punto ng Data

Ang talahanayan sa kaliwa ay nagpapakita ng dosis, capsid serotype, mga antas ng FVIII, at bilang ng mga site ng pagsasama (IS) para sa 8 mga aso na kasama sa pag-aaral. Sampung taon pagkatapos ng pagbubuhos, ang mga antas ng FVIII sa 2 sa 8 mga hayop ay <1% at mula sa 2.9% hanggang 8.6% sa iba pang 6 na hayop. Ang mga site ng pagsasama ay pinag-aralan gamit ang 2 pamamaraan (target-enrichment sequencing, TES, at linear amplification-mediated PCR, LAM-PCR). Ang grap sa kanan ay nagpapakita ng kaugnay na pamamahagi ng IS para sa bawat hayop.

Ang genomic DNA mula sa 2 hepatic site para sa bawat hayop ay nasuri para sa pagsasama ng vector-genome. Ang mga form ng pagsasama (vector-genome) ay nagkakahalaga ng 4.6% at mga yugto ng episomal (vector-vector) na nagkakahalaga ng 95.4% ng mga nabasa. Ang mga resulta na ito ay nagpapahiwatig na ang mga expression vectors na pinapanatili ng nakararami ng isang yugto ng form 10+ taon pagkatapos ng pagbubuhos.

Ipinapakita ng talahanayan na ito ang 10 pinaka-karaniwang mga site ng pagsasama (kromosoma, laki, gene, at lokasyon) batay sa pamamaraan ng TES. Batay sa parehong mga pamamaraan ng pagkakasunud-sunod, ang pinakakaraniwang mga site ng pagsasama ay natagpuan sa malapit sa KCNIP2, CLIC2, ABCB1, at F8 gene.

KAUGNAY NA NILALAMAN

Mga Interactive na Webinar