การตรวจสอบไซต์การรวมเวกเตอร์ในแนวทางการบำบัดด้วยยีนใน Vivo โดยการจัดลำดับไซต์

ไฮไลท์จากการประชุมประจำปี ESGCT ครั้งที่ 28

การตรวจสอบไซต์การรวมเวกเตอร์ในแนวทางการบำบัดด้วยยีนใน Vivo โดยการจัดลำดับไซต์

ดี เชซานา¹, คาลาเบรีย¹, แอล รูดิลอสโซ¹, พี กัลลินา¹, จี สปินอซซี่¹, มักนานี², เอ็ม ปูโซลส์³, เอฟ ฟูมากาลี¹, วี คาลบี้¹, เอ็ม วิทเซล⁴, เอฟดี บุชแมน⁵, คันโตเร¹, เอ็น เทย์เลอร์³, VS ซิมเมอร์มันน์³, ซี ไคลน์⁴, ฟิชเชอร์², เอ็ม คาวาซซาน่า², อี ซิกส์², เอ ไอยิต¹, แอล นัลดินี¹, อี มอนตินี¹

¹สถาบัน San Raffaele Telethon สำหรับการบำบัดด้วยยีน (HSR-TIGET)

²ห้องปฏิบัติการ Human Lymphohematopoiesis, INSERM, France

³Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, ฝรั่งเศส

⁴โรงพยาบาลเด็ก Dr. von Hauner, LMU, Germany

⁵ภาควิชาจุลชีววิทยา UPenn สหรัฐอเมริกา

จุดข้อมูลสำคัญ

IS ดึงจาก DNA ที่ปราศจากเซลล์ทำให้บริสุทธิ์จากของเหลวในร่างกาย
การระบุลักษณะเฉพาะของโปรไฟล์การรวม Lentivirus (LV) ในสุนัขฮีโมฟีเลีย

IS ดึงจาก DNA ที่ปราศจากเซลล์ทำให้บริสุทธิ์จากของเหลวในร่างกาย

DNA ปลอดเซลล์ (cfDNA) ถูกปล่อยเข้าสู่กระแสเลือดจากเซลล์อวัยวะที่แข็งแรง อักเสบ หรือเป็นโรค (เช่น ตับหรือต่อมไทมัส) ที่เกิดกระบวนการอะพอพโทซิสหรือเนื้อร้าย การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมใน cfDNA ที่บริสุทธิ์ ซึ่งรวมถึงไซต์การรวมเวกเตอร์กับจีโนม (IS) จากเซลล์ที่ทรานส์ดิวซ์ สามารถตรวจพบได้โดยการจัดลำดับไซต์การรวมการตรวจชิ้นเนื้อของเหลว (LiBIS-seq)

การระบุลักษณะเฉพาะของโปรไฟล์การรวม Lentivirus (LV) ในสุนัขฮีโมฟีเลีย

สุนัขฮีโมฟีเลียที่โตเต็มวัยสามตัว (O21, M57 และ O59) ได้รับการฉีด LV เพียงครั้งเดียวซึ่งแสดงรูปแบบต่างๆ ของ FIX การแข็งตัวของเลือดในสุนัข สำหรับสุนัขแต่ละตัว cfDNA จะถูกทำให้บริสุทธิ์จากซีรัมในเลือดที่เก็บเกี่ยวที่จุดเวลาที่ต่างกัน 7-8 จุด โดยเริ่มตั้งแต่ 30 ถึง 532 วันหลังการฉีด กราฟนี้แสดงขนาดประชากรโดยประมาณของสำเนาพันธุ์ของเซลล์ที่ทำเครื่องหมายไว้ซึ่งมีส่วนทำให้เกิด IS ที่ใช้ร่วมกันในช่วงเวลาหนึ่งในสุนัข M57 และ O59