Pogostost, lokacija in narava vektorskih vstavkov AAV po dolgotrajnem spremljanju dostave transgena FVIII v modelu psa s hemofilijo A
Poudarki navideznega kongresa ISTH 2020

Pogostost, lokacija in narava vektorskih vstavkov AAV po dolgotrajnem spremljanju dostave transgena FVIII v modelu psa s hemofilijo A

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Opatija Pender1, Sofija Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 in David Lillicrap1

1Oddelek za patologijo in molekularno medicino, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, Kalifornija, ZDA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Nemčija.

3Storitve oskrbe živali, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

Ključne podatkovne točke

Tabela na levi prikazuje odmerek, kapsidni serotip, ravni FVIII in število mest integracije (IS) za 8 psov, vključenih v študijo. Deset let po infuziji so bile ravni FVIII pri 2 od 8 živali <1% in pri ostalih 2.9 živalih od 8.6% do 6%. Integracijska mesta smo analizirali z uporabo dveh metod (zaporedje obogatitve ciljev, TES in PCR s pomočjo linearne ojačitve, LAM-PCR). Graf na desni prikazuje relativno porazdelitev IS za vsako žival.

Za integracijo vektorskega genoma smo analizirali genomsko DNK z 2 jetrnih mest za vsako žival. Integracijske oblike (vektor-genom) so predstavljale 4.6%, epizomske oblike (vektor-vektor) pa 95.4% odčitka. Ti rezultati kažejo, da so ekspresijski vektorji 10 let po infuziji večinoma ohranjali epizomsko obliko.

Ta tabela prikazuje 10 najpogostejših integracijskih mest (kromosom, velikost, gen in lokacija), ki temeljijo na metodi TES. Na podlagi obeh metod zaporedja so bila najpogostejša spletna mesta integracije najdena v bližini KCNIP2, CLIC2, ABCB1 in F8 geni.

POVEZANA VSEBINA