Мониторинг сайтов интеграции векторов в подходах к генной терапии in vivo с помощью секвенирования сайтов интеграции с жидкой биопсией

Основные моменты 28-го ежегодного конгресса ESGCT

Мониторинг сайтов интеграции векторов в подходах к генной терапии in vivo с помощью секвенирования сайтов интеграции с жидкой биопсией

Д Чезана¹, Калабрия¹, Л. Рудилоссо¹, П. Галлина¹, Дж. Спиноцци¹, Маньяни², М Пусоль³, Ф Фумагалли¹, В Калби¹, М. Витцель⁴, Ф.Д. Бушман⁵, Песнь¹, Н. Тейлор³, В.С. Циммерманн³, К. Кляйн⁴, А. Фишер², М. Каваззана², Е Шесть², А Айути¹, Л. Налдини¹, Э. Монтини¹

¹Институт генной терапии San Raffaele Telethon (HSR-TIGET)

²Лаборатория лимфогематопоэза человека, ИНСЕРМ, Франция

³Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, Франция

⁴Детская больница доктора фон Хаунера, LMU, Германия

⁵Отделение микробиологии, UPenn, США

Ключевые данные

Извлечение IS из внеклеточной ДНК, очищенной из жидкостей организма
Характеристика профиля интеграции лентивирусов (LV) у собак с гемофилией

Извлечение IS из внеклеточной ДНК, очищенной из жидкостей организма

Бесклеточная ДНК (вкДНК) выделяется в кровь из здоровых, воспаленных или больных клеток твердых органов (таких как печень или тимус), подвергающихся апоптозу или некрозу. Генетические изменения в очищенной вкДНК, включая сайты вектор-геномной интеграции (IS) из трансдуцированных клеток, могут быть обнаружены с помощью секвенирования сайтов интеграции жидкой биопсии (LiBIS-seq).

Характеристика профиля интеграции лентивирусов (LV) у собак с гемофилией

Трем взрослым собакам с гемофилией (O21, M57 и O59) была введена одна инъекция LV, экспрессирующих различные варианты FIX коагуляции у собак. Для каждой собаки вкДНК очищали из сыворотки крови, собранной в 7-8 различных временных точках, начиная с 30-532 дней после инъекции. Этот график показывает предполагаемый размер популяции меченых клонов клеток, вносящих вклад в общие IS с течением времени у собак M57 и O59.