Вариант фактора VIII с элиминацией сайта N-гликозилирования в 2118 г. Снижение иммунного ответа против FVIII у мышей с гемофилией А, получавших генную терапию

Основные моменты 25-го ежегодного собрания ASGCT

Вариант фактора VIII с элиминацией сайта N-гликозилирования в 2118 г. Снижение иммунного ответа против FVIII у мышей с гемофилией А, получавших генную терапию

Представлено: Кэрол Х. Мяо, доктор медицинских наук, Детский научно-исследовательский институт Сиэтла, Сиэтл, Вашингтон, США

Кэрол Х. Мяо^1,4, Мэн-Ни Фан¹, Шуайшуай Ван², Цзюньпин Чжан³, Сяохэ Цай¹, Тинг-Йен Чао¹, Лей Ли², Вэйдун Сяо³, Барбара А. Конкл⁴

¹Детский научно-исследовательский институт Сиэтла, Сиэтл, Вашингтон
²Университет штата Джорджия, Атланта, Джорджия
³Университет Индианы, Индианаполис, Индиана
⁴Вашингтонский университет, Сиэтл, Вашингтон

Ключевые данные

Развитие ингибитора после инфузии WT-BDD-FVIII и мутантных вариантов FVIII
Пролиферация CD4+ Т-клеток в ответ на перекрывающиеся маннозилированные пептиды

Развитие ингибитора после инфузии WT-BDD-FVIII и мутантных вариантов FVIII

Мышам с гемофилией А гидродинамически вводили плазмиды, кодирующие мутированные варианты FVIII и WT BDD-FVIII, соответственно. Вторую стимуляцию проводили с помощью гидродинамической инъекции во всех группах на 86-й день. (A) Слева направо: плазмиды дикого типа (WT)-BDD-FVIII, используемые для мутагенеза от N до Q, полученные конструкции вариантов FVIII, используемые для in vivo генная терапия и относительный ответ антител против FVIII. (B) Уровни FVIII-специфического IgG анализировали с помощью ELISA после первой и второй стимуляции плазмидой. Иммунный ответ против FVIII был значительно снижен у мышей, получавших плазмиду, несущую вариант FVIII N2118Q.

Пролиферация CD4+ Т-клеток в ответ на перекрывающиеся маннозилированные пептиды

(A) Перекрывающиеся пептиды, окружающие сайт N2118, длиной 15 аминокислот, были синтезированы с присоединением Man6GlcNAc2 с высоким содержанием маннозы. (B) Уровни пролиферации CD4+ T-клеток измеряли в ответ на маннозилированные пептиды MP1 (левая панель), MP2 (средняя панель) и MP3 (правая панель) и их негликозилированные аналоги (NGP1, NGP2 и NGP3). Данные представлены как средние значения со стандартным отклонением из трех отдельных экспериментов (**P <0.01, ***P <0.001).