Frecvența, locația și natura inserțiilor vectoriale AAV după urmărirea pe termen lung a livrării transgenice FVIII într-o hemofilie Un model de câine
Repere din congresul virtual ISTH 2020

Frecvența, locația și natura inserțiilor vectoriale AAV după urmărirea pe termen lung a livrării transgenice FVIII într-o hemofilie Un model de câine

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 și David Lillicrap1

1Departamentul de patologie și medicină moleculară, Universitatea Queen's, Kingston, Ontario, Canada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, SUA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Germania.

3Servicii de îngrijire a animalelor, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

Puncte cheie de date

Tabelul din stânga prezintă doza, serotipul capsidei, nivelurile FVIII și numărul de situri de integrare (IS) pentru cei 8 câini incluși în studiu. La zece ani după perfuzie, nivelurile de FVIII la 2 din cele 8 animale au fost <1% și au variat de la 2.9% la 8.6% la celelalte 6 animale. Siturile de integrare au fost analizate folosind 2 metode (secvențierea de îmbogățire a țintei, TES și PCR mediată de amplificare liniară, LAM-PCR). Graficul din dreapta arată distribuția relativă a IS pentru fiecare animal.

ADN-ul genomic din 2 site-uri hepatice pentru fiecare animal a fost analizat pentru integrarea vector-genom. Formele de integrare (vector-genom) au reprezentat 4.6%, iar formele episomale (vector-vector) au reprezentat 95.4% din numărul de citit. Aceste rezultate indică faptul că vectorii de expresie au menținut predominant o formă episomală la 10+ ani după perfuzie.

Acest tabel prezintă cele mai comune 10 site-uri de integrare (cromozom, dimensiune, genă și locație) pe baza metodei TES. Pe baza ambelor metode de secvențare, cele mai comune site-uri de integrare au fost găsite în apropierea KCNIP2, CLIC2, ABCB1 și F8 gene.

CONTINUT ASEMANATOR