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Destaques do 28º Congresso Anual ESGCT
Monitoramento de locais de integração de vetores em abordagens de terapia gênica in vivo por sequenciamento de locais de integração de biópsia líquida
D Cesana1, A Calábria1, L Rudilosso1, P Galina1, G Spinozzi1, A Magnani2, M Pouzoles3, F Fumagalli1, V Calbi1, M. Witzel4, FD Bushman5, Um Cantor1, N Taylor3, VS Zimmermann3, C Klein4, Um fischer2, M Cavazzana2, E Seis2, A Aiuti1, L Naldini1, E Montini1
1Instituto Teleton San Raffaele para Terapia Genética (HSR-TIGET)
2Laboratório de Linfohematopoiese Humana, INSERM, França
3Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, França
4Hospital Infantil Dr. von Hauner, LMU, Alemanha
5Departamento de Microbiologia, UPenn, EUA
Pontos de dados principais
- Recuperação de IS de DNA livre de células purificado de fluidos corporais
- Caracterização do perfil de integração do Lentivirus (LV) em cães hemofílicos
O DNA livre de células (cfDNA) é liberado no sangue a partir de células de órgãos sólidos saudáveis, inflamados ou doentes (como fígado ou timo) que sofrem apoptose ou necrose. Alterações genéticas no cfDNA purificado, incluindo sítios de integração genômica (IS) de vetor de células transduzidas, podem ser detectadas por sequenciamento de sítio de integração de biópsia líquida (LiBIS-seq).
Três cães adultos hemofílicos (O21, M57 e O59) receberam uma única injeção de LVs expressando diferentes versões de FIX de coagulação canina. Para cada cão, o cfDNA foi purificado do soro sanguíneo colhido em 7–8 pontos de tempo diferentes, começando de 30 a 532 d após a injeção. Este gráfico mostra o tamanho estimado da população de clones de células marcadas que contribuem para os ISs compartilhados ao longo do tempo em cães M57 e O59.
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