Frequência, localização e natureza das inserções de vetores de AAV após acompanhamento de longo prazo da administração do transgene FVIII em um modelo de cão com hemofilia A
Destaques do Congresso Virtual ISTH 2020

Frequência, localização e natureza das inserções de vetores de AAV após acompanhamento de longo prazo da administração do transgene FVIII em um modelo de cão com hemofilia A

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 e David Lillicrap1

1Departamento de Patologia e Medicina Molecular, Queen's University, Kingston, Ontário, Canadá.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, EUA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Alemanha.

3Animal Care Services, Queen's University, Kingston, Ontário, Canadá.

Pontos de dados principais

A tabela à esquerda mostra a dose, o sorotipo do capsídeo, os níveis de FVIII e o número de locais de integração (IS) para os 8 cães incluídos no estudo. Dez anos após a infusão, os níveis de FVIII em 2 dos 8 animais eram <1% e variaram de 2.9% a 8.6% nos outros 6 animais. Os locais de integração foram analisados ​​usando 2 métodos (sequenciação de enriquecimento do alvo, TES e PCR mediada por amplificação linear, LAM-PCR). O gráfico à direita mostra a distribuição relativa de SI para cada animal.

O DNA genômico de 2 sítios hepáticos para cada animal foi analisado quanto à integração vetor-genoma. As formas de integração (vetor-genoma) representaram 4.6% e as formas epissomais (vetor-vetor) representaram 95.4% das contagens de leitura. Estes resultados indicam que os vetores de expressão mantiveram predominantemente uma forma epissomal 10+ anos após a infusão.

Esta tabela mostra os 10 locais de integração mais comuns (cromossomo, tamanho, gene e localização) com base no método TES. Com base em ambos os métodos de sequenciamento, os locais de integração mais comuns foram encontrados nas proximidades do KCNIP2, CLIC2, ABCB1 e F8 genes.

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