Frequentie, locatie en aard van AAV-vectorinserties na langdurige follow-up van FVIII-transgene toediening in een hemofilie A-hondenmodel
Hoogtepunten van het ISTH 2020 Virtual Congress

Frequentie, locatie en aard van AAV-vectorinserties na langdurige follow-up van FVIII-transgene toediening in een hemofilie A-hondenmodel

Paul Batty1Sylvia Fong2Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abdij Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4Manfred Schmidt3 en David Lillicrap1

1Afdeling Pathologie en Moleculaire Geneeskunde, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, VS.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Duitsland.

3Animal Care Services, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

Belangrijke gegevenspunten

De tabel aan de linkerkant toont de dosis, het capside-serotype, de FVIII-niveaus en het aantal integratieplaatsen (IS) voor de 8 honden die in het onderzoek waren opgenomen. Tien jaar na infusie waren de FVIII-spiegels bij 2 van de 8 dieren <1% en varieerden van 2.9% tot 8.6% bij de andere 6 dieren. Integratieplaatsen werden geanalyseerd met behulp van 2 methoden (doelverrijkingssequentiebepaling, TES en lineaire amplificatie-gemedieerde PCR, LAM-PCR). De grafiek aan de rechterkant toont de relatieve verdeling van IS voor elk dier.

Genomisch DNA van 2 leverplaatsen voor elk dier werd geanalyseerd op vector-genoomintegratie. Integratievormen (vectorgenoom) waren goed voor 4.6% en episomale vormen (vector-vector) waren goed voor 95.4% van de gelezen tellingen. Deze resultaten geven aan dat de expressievectoren 10+ jaar na infusie overwegend een episomale vorm hebben behouden.

Deze tabel toont de 10 meest voorkomende integratieplaatsen (chromosoom, grootte, gen en locatie) op basis van de TES-methode. Op basis van beide sequentiemethoden werden de meest voorkomende integratieplaatsen gevonden in de nabijheid van het KCNIP2, CLIC2, ABCB1 en F8 genen.

GERELATEERDE INHOUD