Samenvatting en implicaties van AAV-integratie

Klonale expansies waargenomen bij 5 van de 9 honden met hemofilie A die geïnfuseerd waren met een AAV-vector die een factor VIII (FVIII)-transgen bevat. Klonale uitbreidingen worden aangegeven door het dichtstbijzijnde geïdentificeerde gen. Sommige van deze uitbreidingen werden gevonden in de buurt van genen die geassocieerd zijn met tumorigenese (bijv. de groene balk in Linus bevond zich in de buurt van genen verwijderd in Leukemie 2, DLEU2, en DLEU2-achtig DLEU2L).

Conclusies

• Stabiele en aanhoudende FVIII tot 10 jaar tot expressie gebracht in een hondenmodel van hemofilie A. Een toename in FVIII-activiteit werd waargenomen bij 2 van de 9 honden.
• Klonale expansie waargenomen met geïntegreerd AAV-DNA in de buurt van met kanker geassocieerde genen. Mechanismen van mogelijke insertie-activering onbekend.
• Geen enkele hond had bewijs van tumorigenese of leverknobbeltjes ondanks de uitgebreide klonen
• Het is onduidelijk waarom twee honden een toename in FVIII-niveaus vertoonden, maar het eenvoudigste model is mogelijk een uitbreidende kloon met intact FVIII-gen, hoewel dit niet werd geïdentificeerd in het onderzoek
• De grote meerderheid van de door AAV gecodeerde transgenen wordt geïnactiveerd door mutatie, wat een mogelijkheid biedt voor optimalisatie