Kekerapan, Lokasi dan Sifat Penyisipan Vektor AAV Selepas Susulan Penyebaran Transgene FVIII dalam Model Hemofilia A Anjing
Sorotan Dari Kongres Maya ISTH 2020

Kekerapan, Lokasi dan Sifat Penyisipan Vektor AAV Selepas Susulan Penyebaran Transgene FVIII dalam Model Hemofilia A Anjing

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 dan David Lillicrap1

1Jabatan Patologi dan Perubatan Molekul, Universiti Queen, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, Amerika Syarikat.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Jerman.

3Perkhidmatan Penjagaan Haiwan, Universiti Queen, Kingston, Ontario, Kanada.

Titik Data Utama

Jadual di sebelah kiri menunjukkan dos, serotaip kapsid, tahap FVIII, dan bilangan laman integrasi (IS) untuk 8 anjing yang termasuk dalam kajian ini. Sepuluh tahun selepas infusi, tahap FVIII pada 2 daripada 8 haiwan itu <1% dan berkisar antara 2.9% hingga 8.6% pada 6 haiwan lain. Laman integrasi dianalisis menggunakan 2 metode (urutan pengayaan sasaran, TES, dan PCR dimediasi penguatan linear, LAM-PCR). Grafik di sebelah kanan menunjukkan taburan relatif IS untuk setiap haiwan.

DNA genom dari 2 lokasi hepatik untuk setiap haiwan dianalisis untuk integrasi vektor-genom. Bentuk integrasi (vektor-genom) menyumbang 4.6% dan bentuk episomal (vektor-vektor) menyumbang 95.4% daripada jumlah bacaan. Hasil ini menunjukkan bahawa vektor ekspresi mengekalkan terutamanya bentuk episomal 10+ tahun setelah infus.

Jadual ini menunjukkan 10 laman integrasi yang paling biasa (kromosom, saiz, gen, dan lokasi) berdasarkan kaedah TES. Berdasarkan kedua-dua kaedah penjujukan, laman integrasi yang paling umum dijumpai berdekatan dengan KCNIP2, CLIC2, ABCB1, dan F8 gen.

KANDUNGAN YANG BERKAITAN

Webinars Interaktif