AAV vektoru ievietošanas biežums, atrašanās vieta un raksturs pēc FVIII transgēna piegādes ilgtermiņa sekošanas suņu hemofilijas modelim
Svarīgākie notikumi no ISTH 2020 virtuālā kongresa

AAV vektoru ievietošanas biežums, atrašanās vieta un raksturs pēc FVIII transgēna piegādes ilgtermiņa sekošanas suņu hemofilijas modelim

Pols Batijs1, Silvija Foga2, Matteo Franko3, Irēna Gila-Farina3, Aomei Mo1, Loriana Harpela1, Kristīne Hjū1, Deivids Hurlbuts1, Abbey Pender1, Sofija Sardo Infirri1, Endrjū Vinterborns4, Manfreds Šmits3 un Deivids Lillicrap1

1Kingstonas Universitātes Patoloģijas un molekulārās medicīnas nodaļa, Kingstona, Ontārio, Kanāda.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, ASV.

3GeneWerk GmbH, Heidelberga, Vācija.

3Dzīvnieku kopšanas pakalpojumi, Karalienes universitāte, Kingstona, Ontārio, Kanāda.

Galvenie datu punkti

Kreisajā pusē esošajā tabulā ir redzama deva, kapsiīda serotips, FVIII līmenis un integrācijas vietu skaits (IS) 8 pētījumā iekļautajiem suņiem. Desmit gadus pēc infūzijas FVIII līmenis 2 no 8 dzīvniekiem bija <1% un pārējiem 2.9 dzīvniekiem svārstījās no 8.6% līdz 6%. Integrācijas vietas tika analizētas, izmantojot 2 metodes (mērķa bagātināšanas sekvencēšana, TES un lineārā amplifikācija-mediēta PCR, LAM-PCR). Labajā pusē redzamais grafiks parāda relatīvo IS sadalījumu katram dzīvniekam.

Katra dzīvnieka genoma DNS no 2 aknu vietām tika analizēta, lai integrētu vektoru un genomu. Integrācijas formas (vektors-genoms) veidoja 4.6% un epizomālās formas (vektors-vektors) veidoja 95.4% no lasīto skaita. Šie rezultāti norāda, ka ekspresijas vektori pārsvarā saglabāja epizomu formu 10 un vairāk gadus pēc infūzijas.

Šajā tabulā parādītas 10 visbiežāk sastopamās integrācijas vietas (hromosoma, lielums, gēns un atrašanās vieta), pamatojoties uz TES metodi. Pamatojoties uz abām sekvencēšanas metodēm, visbiežāk sastopamās integrācijas vietas tika atrastas netālu no KCNIP2, CLIC2, ABCB1 un F8 gēni.

SAISTĪTAIS SATURS