AAV vektorių intarpų dažnis, vieta ir pobūdis po ilgalaikio FVIII transgeno pristatymo hemofilija sergančio šuns modelyje
Svarbiausi dalykai iš ISTH 2020 virtualiojo kongreso

AAV vektorių intarpų dažnis, vieta ir pobūdis po ilgalaikio FVIII transgeno pristatymo hemofilija sergančio šuns modelyje

Paulius Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, Davidas Hurlbutas1, „Abbey Pender“1, Sofija Sardo Infirri1, Andrew Winterbornas4, Manfredas Schmidtas3 ir Davidas Lillicrapas1

1Karalienės universiteto Kingstono universiteto patologijos ir molekulinės medicinos katedra, Ontarijas, Kanada.

2„BioMarin Pharmaceutical“, Novato, CA, JAV.

3„GeneWerk GmbH“, Heidelbergas, Vokietija.

3Gyvūnų priežiūros paslaugos, Karalienės universitetas, Kingstonas, Ontarijas, Kanada.

Pagrindiniai duomenų taškai

Kairėje esančioje lentelėje pateikiama 8 į tyrimą įtrauktų šunų dozė, kapsidės serotipas, FVIII lygis ir integracijos vietų skaičius (IS). Praėjus dešimčiai metų po infuzijos, 2 iš 8 gyvūnų FVIII lygis buvo <1%, o kitiems 2.9 gyvūnams jis svyravo nuo 8.6% iki 6%. Integracijos vietos buvo analizuojamos taikant 2 metodus (taikinio praturtinimo sekos nustatymas, TES ir linijinės amplifikacijos medijuojama PGR, LAM-PCR). Dešinėje pateiktame grafike parodytas santykinis kiekvieno gyvūno IS pasiskirstymas.

Genominė DNR iš 2 kepenų vietų kiekvienam gyvūnui buvo analizuojama vektoriaus ir genomo integracijai. Integracijos formos (vektoriaus genomas) sudarė 4.6%, o epizominės formos (vektorius-vektorius) - 95.4% skaitytų skaičių. Šie rezultatai rodo, kad ekspresijos vektoriai išlaikė epizominę formą praėjus 10 ir daugiau metų po infuzijos.

Šioje lentelėje parodyta 10 labiausiai paplitusių integracijos vietų (chromosoma, dydis, genas ir vieta), remiantis TES metodu. Remiantis abiem sekvenavimo metodais, labiausiai paplitusios integracijos vietos buvo rastos šalia „KCNIP2“, „CLIC2“, „ABCB1“ ir „F8“ genai.

SUSIJUSIAS TURINYS