ვექტორული ინტეგრაციის ადგილების მონიტორინგი In Vivo გენური თერაპიის მიდგომებში თხევადი-ბიოფსია-ინტეგრაციის-უბნის თანმიმდევრობით

მაჩვენებლები ESGCT 28-ე ყოველწლიური კონგრესიდან

ვექტორული ინტეგრაციის ადგილების მონიტორინგი In Vivo გენური თერაპიის მიდგომებში თხევადი-ბიოფსია-ინტეგრაციის-უბნის თანმიმდევრობით

დ ცეზანა¹, კალაბრია¹, ლ რუდილოსო¹, პ გალინა¹, გ სპინოცი¹, მაგნანი², მ პუზოლესი³, ფ ფუმაგალი¹, V კალბი¹, მ ვიცელი⁴, ფ.დ. ბუშმანი⁵, კანტორე¹, ნ ტეილორი³, VS Zimmermann³, სი კლეინი⁴, ფიშერი², მ კავაზანა², ე ექვსი², A Aiuti¹, ლ ნალდინი¹, ე მონტინი¹

¹San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (HSR-TIGET)

²ადამიანის ლიმფოჰემატოპოეზის ლაბორატორია, INSERM, საფრანგეთი

³Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, საფრანგეთი

⁴დოქტორი ფონ ჰაუნერის ბავშვთა საავადმყოფო, LMU, გერმანია

⁵მიკრობიოლოგიის დეპარტამენტი, UPenn, აშშ

მონაცემთა ძირითადი პუნქტები

IS მოპოვება უჯრედებისგან თავისუფალი დნმ-დან, რომელიც გაწმენდილია სხეულის სითხეებიდან
ლენტივირუსის (LV) ინტეგრაციის პროფილის დახასიათება ჰემოფილურ ძაღლებში

IS მოპოვება უჯრედებისგან თავისუფალი დნმ-დან, რომელიც გაწმენდილია სხეულის სითხეებიდან

უჯრედებისგან თავისუფალი დნმ (cfDNA) გამოიყოფა სისხლში ჯანმრთელი, ანთებითი ან დაავადებული მყარი ორგანოს უჯრედებიდან (როგორიცაა ღვიძლი ან თიმუსი), რომლებიც განიცდიან აპოპტოზს ან ნეკროზის. გაწმენდილი cfDNA-ში გენეტიკური ცვლილებები, მათ შორის, ტრანსდუცირებული უჯრედებიდან ვექტორ-გენომიური ინტეგრაციის ადგილების (IS) ჩათვლით, შეიძლება გამოვლინდეს თხევადი ბიოფსიის ინტეგრაციის ადგილის თანმიმდევრობით (LiBIS-seq).

ლენტივირუსის (LV) ინტეგრაციის პროფილის დახასიათება ჰემოფილურ ძაღლებში

სამმა ზრდასრულმა ჰემოფილურმა ძაღლმა (O21, M57 და O59) მიიღო LV-ების ერთი ინექცია, რომელიც გამოხატავს ძაღლების კოაგულაციის FIX-ის სხვადასხვა ვერსიებს. თითოეული ძაღლისთვის cfDNA გაწმენდილი იყო სისხლის შრატიდან, რომელიც აღებული იყო 7-8 სხვადასხვა დროის მომენტში, ინექციის შემდეგ 30-დან 532 დღემდე. ეს გრაფიკი აჩვენებს მონიშნული უჯრედის კლონების პოპულაციის სავარაუდო ზომას, რომლებიც ხელს უწყობენ საერთო IS-ებს დროთა განმავლობაში ძაღლებში M57 და O59.