CRISPR/Cas9 mRNA LNP-ების მიწოდება FVIII გენის მცირე წაშლის აღსადგენად ჰემოფილია A თაგვებში

მაჩვენებლები ASGCT 25-ე ყოველწლიური შეხვედრიდან

CRISPR/Cas9 mRNA LNP-ების მიწოდება FVIII გენის მცირე წაშლის აღსადგენად ჰემოფილია A თაგვებში

პრეზენტაცია: Chun-Yu Chen, PhD, Fellow-PhD | იმუნიტეტი და იმუნოთერაპია, სიეტლი ბავშვთა სიეტლი, ვაშინგტონი, შეერთებული შტატები

გადახედეთ აბსტრაქტს

ჩუნ-იუ ჩენ¹, კაი სიაოჰე¹კეროლ მიაო^1,2

¹სიეტლის ბავშვთა კვლევითი ინსტიტუტი, სიეტლი, ვაშინგტონი

²პედიატრიის დეპარტამენტი, ვაშინგტონის უნივერსიტეტი, სიეტლი, ვაშინგტონი

მონაცემთა ძირითადი პუნქტები

mRNA LNP მიზნად ისახავს როგორც ჰეპატოციტებს, ასევე LSEC-ებს
Cas9 და sgRNA LNP საშუალებას აძლევს NSG HemA თაგვებს აღადგინონ ენდოგენური პლაზმური FVIII აქტივობა

mRNA LNP მიზნად ისახავს როგორც ჰეპატოციტებს, ასევე ღვიძლის ენდოთელიალურ სინუსოიდულ უჯრედებს (LSEC)

ლუციფერაზას mRNA (Luc) სხვადასხვა ფორმულირებები, რომლებიც ინკაფსულირებულია MC3-ზე დაფუძნებულ ლიპიდურ ნანონაწილაკებში (LNPs) ინტრავენურად შეიყვანეს თაგვებში. ლუციფერაზას ექსპრესია ძირითადად გამოვლინდა ღვიძლში, ყველაზე ძლიერი ექსპრესიით ნაჩვენებია LNP ფორმულირებით 5. ღვიძლის იმუნოშეღებვის შეღებვამ აჩვენა, რომ Dil-ით ეტიკეტირებული LNP წარმატებით ახორციელებს ჰეპატოციტების და ენდოთელური უჯრედების ტრანსფორმაციას. in vivo.

Cas9 და sgRNA LNP საშუალებას აძლევს NSG HemA თაგვებს აღადგინონ ენდოგენური პლაზმური FVIII აქტივობა

კაფსულირებული Cas9 mRNA და ერთი სახელმძღვანელო რნმ (sgRNA) LNP-ები გადაეცა იმუნოდეფიციტური ჰემოფილიით A (NSG HA) თაგვებს ინტრავენურად. ენდოგენური FVIII-ის სტაბილური გამოხატვა 4 კვირამდე დადასტურდა aPTT ანალიზით და რედაქტირებული მუტანტი FVIII დამოწმებული იყო დნმ-ის სეკვევენირებისა და ონლაინ CRISPR ანალიზის ხელსაწყოებით, შესაბამისად.