Frekuensi, Lokasi dan Sifat Penyisipan Vektor AAV Setelah Tindak Lanjut Jangka Panjang Pengiriman Transgen FVIII dalam Model Anjing Hemofilia A
Sorotan Dari Kongres Virtual ISTH 2020

Frekuensi, Lokasi dan Sifat Penyisipan Vektor AAV Setelah Tindak Lanjut Jangka Panjang Pengiriman Transgen FVIII dalam Model Anjing Hemofilia A

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 dan David Lillicrap1

1Departemen Patologi dan Kedokteran Molekuler, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, AS.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Jerman.

3Layanan Perawatan Hewan, Universitas Queen, Kingston, Ontario, Kanada.

Poin Data Utama

Tabel di sebelah kiri menunjukkan dosis, serotipe kapsid, kadar FVIII, dan jumlah lokasi integrasi (IS) untuk 8 anjing yang termasuk dalam penelitian. Sepuluh tahun setelah infus, tingkat FVIII pada 2 dari 8 hewan adalah <1% dan berkisar antara 2.9% hingga 8.6% pada 6 hewan lainnya. Situs integrasi dianalisis menggunakan 2 metode (sekuensing pengayaan target, TES, dan PCR bermediasi amplifikasi linier, LAM-PCR). Grafik di sebelah kanan menunjukkan distribusi relatif IS untuk setiap hewan.

DNA genom dari 2 situs hati untuk setiap hewan dianalisis untuk integrasi vektor-genom. Bentuk integrasi (vektor-genom) menyumbang 4.6% dan bentuk episomal (vektor-vektor) menyumbang 95.4% dari jumlah bacaan. Hasil ini menunjukkan bahwa vektor ekspresi dipertahankan terutama dalam bentuk episom 10+ tahun setelah infus.

Tabel ini menunjukkan 10 lokasi integrasi yang paling umum (kromosom, ukuran, gen, dan lokasi) berdasarkan metode TES. Berdasarkan kedua metode pengurutan, situs integrasi yang paling umum ditemukan di dekat KCNIP2, CLIC2, ABCB1, dan F8 gen.

ISI TERKAIT