Varijanta faktora VIII s eliminacijom mjesta N-glikozilacije na 2118 smanjenih anti-FVIII imunoloških odgovora kod miševa liječenih genskom terapijom hemofilije A

Izdvajamo s 25. godišnjeg sastanka ASGCT-a

Varijanta faktora VIII s eliminacijom mjesta N-glikozilacije na 2118 smanjenih anti-FVIII imunoloških odgovora kod miševa liječenih genskom terapijom hemofilije A

Predstavlja: Carol H. Miao, MD, Seattle Children's Research Institute, Seattle, Washington, Sjedinjene Američke Države

Carol H. Miao^1,4, Meng-Ni Fan¹, Shuaishuai Wang², Junping Zhang³, Xiaohe Cai¹, Ting-Yen Chao¹, Lei Li², Weidong Xiao³, Barbara A. Konkle⁴

¹Seattle Children's Research Institute, Seattle, WA
²Državno sveučilište Georgia, Atlanta, GA
³Sveučilište Indiana, Indianapolis, IN
⁴Sveučilište Washington, Seattle, WA

Ključne podatkovne točke

Razvoj inhibitora nakon infuzije varijanti WT-BDD-FVIII i mutiranog FVIII
Proliferacija CD4+T-stanica kao odgovor na preklapanje manoziliranih peptida

Razvoj inhibitora nakon infuzije varijanti WT-BDD-FVIII i mutiranog FVIII

Hemofiliji A miševima su hidrodinamički ubrizgani plazmidi koji kodiraju mutirane varijante FVIII i WT BDD-FVIII, respektivno. Drugi izazovi izvedeni su hidrodinamičkom injekcijom u svim skupinama 86. dana. (A) S lijeva na desno, plazmidi divljeg tipa (WT)-BDD-FVIII korišteni za mutagenezu N do Q, rezultirajući konstrukti varijante FVIII korišteni za in vivo genska terapija i relativni odgovor antitijela na FVIII. (B) FVIII-specifične razine IgG analizirane su ELISA-om nakon prvog i drugog testiranja plazmida. Anti-FVIII imunološki odgovori bili su značajno smanjeni u miševa liječenih plazmidom koji je nosio varijantu FVIII N2118Q.

Proliferacija CD4+T-stanica kao odgovor na preklapanje manoziliranih peptida

(A) Preklapajući peptidi koji okružuju mjesto N2118, duljine 15 aminokiselina, sintetizirani su s Man6GlcNAc2 dodacima s visokim sadržajem manoze. (B) Razine proliferacije CD4+ T-stanica mjerene su kao odgovor na manozilirane peptide MP1 (lijeva ploča), MP2 (srednja ploča) i MP3 (desna ploča) i njihove neglikozilirane peptide (NGP1, NGP2 i NGP3). Podaci su prikazani kao srednje vrijednosti sa standardnom devijacijom iz tri odvojena eksperimenta (**P <0.01, ***P <0.001).