Učestalost, lokacija i priroda AAV vektorskih umetanja nakon dugotrajnog praćenja isporuke FVIII transgena u modelu psa hemofilije A
Izdvajamo se iz ISTH 2020 Virtualnog kongresa

Učestalost, lokacija i priroda AAV vektorskih umetanja nakon dugotrajnog praćenja isporuke FVIII transgena u modelu psa hemofilije A

Paul Batty1, Silvija Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Opatija Pender1, Sofija Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 i David Lillicrap1

1Odjel za patologiju i molekularnu medicinu, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, Kalifornija, SAD.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Njemačka.

3Usluge njege životinja, Sveučilište Queen, Kingston, Ontario, Kanada.

Ključne podatkovne točke

Tablica slijeva prikazuje dozu, kapsidni serotip, razinu FVIII i broj mjesta integracije (IS) za 8 pasa uključenih u studiju. Deset godina nakon infuzije, razina FVIII u 2 od 8 životinja bila je <1%, a u ostalih 2.9 životinja kretala se od 8.6% do 6%. Mjesta integracije analizirana su pomoću 2 metode (sekvenciranje obogaćivanja cilja, TES i PCR posredovano linearnim pojačavanjem, LAM-PCR). Grafikon s desne strane prikazuje relativnu raspodjelu IS za svaku životinju.

Analizirana je genomska DNK s 2 jetrena mjesta za svaku životinju radi integracije vektora i genoma. Integracijski oblici (vektor-genom) činili su 4.6%, a epizomalni oblici (vektor-vektor) 95.4% čitanja. Ovi rezultati pokazuju da su ekspresijski vektori održavali pretežno epizomalni oblik 10+ godina nakon infuzije.

Ova tablica prikazuje 10 najčešćih mjesta integracije (kromosom, veličina, gen i mjesto) temeljene na TES metodi. Na temelju obje metode slijeđenja, najčešća mjesta integracije pronađena su u blizini KCNIP2, CLIC2, ABCB1 i F8 geni.

POVEZAN SADRŽAJ