Frecuencia, localización e natureza das insercións vectoriais de AAV tras o seguimento a longo prazo do parto transgene FVIII nunha hemofilia Un modelo de can
Destacados do Congreso Virtual ISTH 2020

Frecuencia, localización e natureza das insercións vectoriais de AAV tras o seguimento a longo prazo do parto transgene FVIII nunha hemofilia Un modelo de can

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abadía de Pender1, Sofía Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 e David Lillicrap1

1Departamento de Patoloxía e Medicina Molecular, Queen's University, Kingston, Ontario, Canadá.

2Farmacéutica BioMarin, Novato, CA, Estados Unidos.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Alemaña.

3Servizos de coidado de animais, Queen's University, Kingston, Ontario, Canadá.

Puntos de datos clave

A táboa da esquerda mostra a dose, o serotipo da cápside, os niveis de FVIII e o número de sitios de integración (IS) para os 8 cans incluídos no estudo. Dez anos despois da infusión, os niveis de FVIII en 2 dos 8 animais foron <1% e oscilaron entre o 2.9% e o 8.6% nos outros 6 animais. Os sitios de integración analizáronse empregando 2 métodos (secuenciación de enriquecemento de obxectivos, TES e PCR mediada por amplificación lineal, LAM-PCR). A gráfica da dereita mostra a distribución relativa do IS para cada animal.

Analizouse o ADN xenómico de 2 sitios hepáticos para cada animal para a integración vector-xenoma. As formas de integración (vector-xenoma) representaron o 4.6% e as formas episómicas (vector-vector) o 95.4% das contas lidas. Estes resultados indican que a expresión dos vectores mantivo predominantemente unha forma episomal 10+ anos despois da infusión.

Esta táboa mostra os 10 sitios de integración máis comúns (cromosoma, tamaño, xene e localización) baseados no método TES. Con base nos dous métodos de secuenciación, atopáronse os sitios de integración máis comúns nas proximidades do KCNIP2, CLIC2, ABCB1 e F8 xenes.

CONTIDO RELACIONADO