Un variant du facteur VIII avec élimination du site de N-glycosylation à 2118 réponses immunitaires anti-FVIII réduites chez des souris hémophiles A traitées par thérapie génique

Faits saillants de la 25e réunion annuelle de l'ASGCT

Un variant du facteur VIII avec élimination du site de N-glycosylation à 2118 réponses immunitaires anti-FVIII réduites chez des souris hémophiles A traitées par thérapie génique

Présenté par : Carol H. Miao, MD, Seattle Children's Research Institute, Seattle, Washington, États-Unis

Carol H. Miao^1,4, Ventilateur Meng Ni¹, Shuaishuai Wang², Junping Zhang³, Xiaohe Cai¹, Ting-Yên Chao¹, Lei Li², Weidong Xiao³, Barbara A. Konkle⁴

¹Institut de recherche sur les enfants de Seattle, Seattle, WA
²Georgia State University, Atlanta, Géorgie
³Université de l'Indiana, Indianapolis, IN
⁴Université de Washington, Seattle, WA

Points de données clés

Développement d'inhibiteurs après perfusion de WT-BDD-FVIII et de variants de FVIII mutés
Prolifération des lymphocytes T CD4 + en réponse au chevauchement des peptides mannosylés

Développement d'inhibiteurs après perfusion de WT-BDD-FVIII et de variants de FVIII mutés

Des souris hémophiles A ont reçu une injection hydrodynamique de plasmides codant pour des variants FVIII mutés et WT BDD-FVIII, respectivement. Les deuxièmes provocations ont été réalisées par injection hydrodynamique dans tous les groupes au jour 86. (A) De gauche à droite, les plasmides de type sauvage (WT) -BDD-FVIII utilisés pour la mutagenèse N à Q, les constructions variantes du FVIII résultantes utilisées pour in vivo la thérapie génique et la réponse relative des anticorps FVIII. (B) Les niveaux d'IgG spécifiques au FVIII ont été analysés par ELISA après les première et deuxième provocations plasmidiques. Les réponses immunitaires anti-FVIII ont été significativement réduites chez les souris traitées avec le plasmide portant le variant FVIII N2118Q.

Prolifération des lymphocytes T CD4 + en réponse au chevauchement des peptides mannosylés

(A) Des peptides se chevauchant entourant le site N2118, d'une longueur de 15 acides aminés, ont été synthétisés avec des pièces jointes Man6GlcNAc2 à haute teneur en mannose glycane. (B) Les niveaux de prolifération des lymphocytes T CD4 + ont été mesurés en réponse aux peptides mannosylés MP1 (panneau de gauche), MP2 (panneau du milieu) et MP3 (panneau de droite) et leurs homologues non glycosylés (NGP1, NGP2 et NGP3). Les données sont présentées sous forme de moyennes avec écart type de trois expériences distinctes (**P <0.01, ***P <0.001).