Tekijä VIII -variantti, jossa N-glykosylaatiokohta eliminoituu 2118:ssa, vähensi anti-FVIII-immuunivasteita geeniterapiassa Hoidetut hemofilia A -hiiret

ASGCT:n 25. vuosikokouksen kohokohdat

Tekijä VIII -variantti, jossa N-glykosylaatiokohta eliminoituu 2118:ssa, vähensi anti-FVIII-immuunivasteita geeniterapiassa Hoidetut hemofilia A -hiiret

Esittäjä: Carol H. Miao, MD, Seattle Children's Research Institute, Seattle, Washington, Yhdysvallat

Carol H. Miao^1,4, Meng-Ni Fan¹, Shuaishuai Wang², Junping Zhang³, Xiaohe Cai¹, Ting-Yen Chao¹, Lei Li², Weidong Xiao³, Barbara A. Konkle⁴

¹Seattle Children's Research Institute, Seattle, WA
²Georgia State University, Atlanta, GA
³Indianan yliopisto, Indianapolis, IN
⁴Washingtonin yliopisto, Seattle, WA

Keskeiset tietopisteet

Inhibiittorin kehittyminen WT-BDD-FVIII- ja mutoituneiden FVIII-varianttien infuusion jälkeen
CD4+T-solujen lisääntyminen vasteena päällekkäisille mannosyloiduille peptideille

Inhibiittorin kehittyminen WT-BDD-FVIII- ja mutoituneiden FVIII-varianttien infuusion jälkeen

Hemofilia A -hiiriin injektoitiin hydrodynaamisesti plasmideja, jotka koodaavat mutatoituja FVIII-variantteja ja vastaavasti WT BDD-FVIII:a. Toinen altistus suoritettiin hydrodynaamisella injektiolla kaikissa ryhmissä päivänä 86. (A) Vasemmalta oikealle villityypin (WT)-BDD-FVIII-plasmidit, joita käytettiin N-Q-mutageneesiin, tuloksena saatuja FVIII-varianttikonstrukteja käytettiin in vivo geeniterapia ja suhteellinen FVIII-vasta-ainevaste. (B) FVIII-spesifiset IgG-tasot analysoitiin ELISA:lla ensimmäisen ja toisen plasmidialtistuksen jälkeen. Anti-FVIII-immuunivasteet vähenivät merkittävästi hiirillä, joita oli käsitelty plasmidilla, joka sisälsi FVIII N2118Q -varianttia.

CD4+T-solujen lisääntyminen vasteena päällekkäisille mannosyloiduille peptideille

(A) Päällekkäiset peptidit, jotka ympäröivät N2118-kohtaa, pituudeltaan 15 aminohappoa, syntetisoitiin runsaasti mannoosia sisältävillä glykaani Man6GlcNAc2-liitoksilla. (B) CD4+ T-solujen proliferaatiotasot mitattiin vasteena mannosyloiduille peptideille MP1 (vasen paneeli), MP2 (keskipaneeli) ja MP3 (oikea paneeli) ja niiden glykosyloimattomille vastineille (NGP1, NGP2 ja NGP3). Tiedot on esitetty keskiarvoina kolmen erillisen kokeen keskihajonnan kanssa (**P <0.01, ***P <0.001).