AAV-vektorien lisäysten tiheys, sijainti ja luonne FVIII-siirtogeenin pitkäaikaisen seurannan jälkeen hemofilia A -koiramallissa
Kohokohdat ISTH 2020: n virtuaalikongressista

AAV-vektorien lisäysten tiheys, sijainti ja luonne FVIII-siirtogeenin pitkäaikaisen seurannan jälkeen hemofilia A -koiramallissa

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 ja David Lillicrap1

1Patologian ja molekyylilääketieteen laitos, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, Yhdysvallat.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Saksa.

3Eläintenhoitopalvelut, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

Keskeiset tietopisteet

Vasemmalla olevassa taulukossa esitetään annos, kapsidiserotyyppi, FVIII-tasot ja integraatiokohtien (IS) lukumäärä tutkimukseen osallistuneille 8 koiralle. Kymmenen vuotta infuusion jälkeen FVIII-tasot kahdessa 2 eläimestä olivat <8% ja vaihtelivat 1% - 2.9% muissa kuudessa eläimessä. Integraatiokohdat analysoitiin käyttämällä kahta menetelmää (kohdeväkevöintisekvensointi, TES ja lineaarisen monistamisen välittämä PCR, LAM-PCR). Oikealla oleva kaavio näyttää IS: n suhteellisen jakauman jokaiselle eläimelle.

Kunkin eläimen 2 maksapaikan genomista DNA: ta analysoitiin vektorigenoomien integraation suhteen. Integraatiomuotojen (vektori-genomi) osuus oli 4.6% ja episomaalisten muotojen (vektori-vektori) osuus oli 95.4% lukemista. Nämä tulokset osoittavat, että ekspressiovektorit säilyivät pääasiassa episomaalisen muodon yli 10 vuotta infuusion jälkeen.

Tämä taulukko näyttää 10 yleisintä integraatiokohtaa (kromosomi, koko, geeni ja sijainti) TES-menetelmän perusteella. Perustuen molempiin sekvensointimenetelmiin, yleisimmät integraatiopaikat löydettiin läheisyydestä KCNIP2, CLIC2, ABCB1 ja F8 geenit.

SAMANKALTAISTA SISÄLTÖÄ