CRISPR/Cas9 mRNA LNP:iden toimittaminen pienen deleetion korjaamiseksi FVIII-geenissä hemofilia A -hiirissä
ASGCT:n 25. vuosikokouksen kohokohdat

CRISPR/Cas9 mRNA LNP:iden toimittaminen pienen deleetion korjaamiseksi FVIII-geenissä hemofilia A -hiirissä

Esittäjä: Chun-Yu Chen, PhD, Fellow-PhD | Immunity & Immunotherapies, Seattle Children's Seattle, Washington, Yhdysvallat

Chun-Yu Chen1, Cai Xiaohe1, Carol Miao1,2

1Seattle Children's Research Institute, Seattle, Washington

2Pediatrian laitos, Washingtonin yliopisto, Seattle, Washington

Keskeiset tietopisteet

mRNA LNP:t kohdistuvat sekä hepatosyyteihin että maksan endoteelin sinusoidisoluihin (LSEC)

Erilaisia ​​lusiferaasi-mRNA:n (Luc) formulaatioita, jotka oli kapseloitu MC3-pohjaisiin lipidinanohiukkasiin (LNP:t), injektoitiin suonensisäisesti hiiriin. Lusiferaasin ilmentyminen havaittiin pääasiassa maksassa, voimakkaimman ilmentymisen osoitti LNP-formulaatio 5. Maksan immunovärjäysvärjäys osoitti, että Dil-leimattu LNP voi onnistuneesti transfektoida sekä hepatosyyttejä että endoteelisoluja in vivo.

Cas9 ja sgRNA LNP:t mahdollistavat NSG HemA -hiirten endogeenisen plasman FVIII-aktiivisuuden palauttamisen

Kapseloidut Cas9-mRNA- ja yhden ohjaus-RNA:n (sgRNA) LNP:t kuljetettiin suonensisäisesti immuunipuutteisille hemofilia A (NSG HA) -hiirille. Endogeenisen FVIII:n vakaa ilmentyminen jopa 4 viikkoa vahvistettiin aPTT-määrityksellä ja muokattu FVIII-mutantti varmistettiin DNA-sekvensoinnilla ja online-CRISPR-analyysityökaluilla, vastaavasti.

SAMANKALTAISTA SISÄLTÖÄ

Interaktiiviset webinaarit
Kuva

Please enable the javascript to submit this form

Bayerin, BioMarinin, CSL Behringin, Freeline Therapeutics Limitedin, Pfizer Inc:n, Spark Therapeuticsin ja uniQure, Inc:n koulutusapurahoilla tukea.

Olennainen SSL