خلاصه کنفرانس: فراوانی ، مکان و ماهیت درج برداری از AAV پس از پیگیری طولانی مدت زایمان ترانس ژن FVIII در مدل سگ هموفیلی

نکات برجسته از کنگره مجازی ISTH 2020

فرکانس ، مکان و ماهیت درج بردار AAV پس از پیگیری طولانی مدت زایمان انتقال FVIII در یک مدل سگ هموفیلی A

پاول بتی¹، سیلویا فونگ²، ماتئو فرانکو³، ایرنه گیل فرینا³، آئومه مو¹، لوریان هارپل¹، کریستین هاو¹، دیوید هورلبوت¹، ابی پندر¹، صوفیا ساردو اینفیری¹، اندرو وینتربورن⁴، مانفرد اشمیت³ و دیوید لیلیکرپ¹

¹گروه آسیب شناسی و پزشکی مولکولی ، دانشگاه کوئین ، کینگستون ، انتاریو ، کانادا.

²بیو مارین دارویی ، نواتو ، کالیفرنیا ، ایالات متحده.

³GeneWerk GmbH ، هایدلبرگ ، آلمان.

³خدمات مراقبت از حیوانات ، دانشگاه کوئین ، کینگستون ، انتاریو ، کانادا.

نقاط داده کلیدی

جدول سمت چپ دوز ، سروتیپ کپسید ، سطح FVIII و تعداد سایت های ادغام (IS) را برای 8 سگ موجود در مطالعه نشان می دهد. ده سال پس از تزریق ، سطح FVIII در 2 از 8 حیوان <1 and بود و در 2.9 حیوان دیگر از 8.6 to تا 6 بود. سایت های ادغام با استفاده از 2 روش (تعیین توالی غنی سازی هدف ، TES و PCR با تقویت واسطه ، LAM-PCR) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نمودار سمت راست توزیع نسبی IS برای هر حیوان را نشان می دهد.

+

DNA ژنومی از 2 سایت کبدی برای هر حیوان برای ادغام وکتور ژنوم مورد بررسی قرار گرفت. فرم های ادغام (بردار ژنوم) 4.6٪ و فرم های اپیزوم (وکتور بردار) 95.4/10٪ از شمارش های خوانده شده را به خود اختصاص داده اند. این نتایج نشان می دهد که بردارهای بیان عمدتا یک فرم اپیزوم XNUMX+ سال پس از تزریق حفظ می شوند.

+

در این جدول 10 سایت متداول ادغام (کروموزوم ، اندازه ، ژن و مکان) بر اساس روش TES نشان داده شده است. بر اساس هر دو روش ترتیب بندی ، متداول ترین محل های ادغام در مجاورت با KCNIP2 ، CLIC2 ، ABCB1 و F8 ژن.