تحویل CRISPR/Cas9 mRNA LNPs برای ترمیم حذف کوچک در ژن FVIII در موش های هموفیلی A
نکات برجسته از 25مین نشست سالانه ASGCT

تحویل CRISPR/Cas9 mRNA LNPs برای ترمیم حذف کوچک در ژن FVIII در موش های هموفیلی A

ارائه شده توسط: Chun-Yu Chen, PhD, Fellow-PhD | ایمنی و ایمونوتراپی، سیاتل کودکان سیاتل، واشنگتن، ایالات متحده آمریکا

چون-یو چن1، کای شیائوهه1، کارول میائو1,2

1موسسه تحقیقات کودکان سیاتل، سیاتل، واشنگتن

2گروه اطفال، دانشگاه واشنگتن، سیاتل، واشنگتن

نقاط داده کلیدی

mRNA LNP ها هم سلول های کبدی و هم سلول های سینوسی اندوتلیال کبد (LSECs) را هدف قرار می دهند.

فرمول‌های مختلفی از mRNA لوسیفراز (Luc) محصور شده در نانوذرات لیپیدی مبتنی بر MC3 (LNPs) به صورت داخل وریدی به موش‌ها تزریق شد. بیان لوسیفراز عمدتاً در کبد شناسایی شد و قوی‌ترین بیان آن توسط فرمول LNP 5 نشان داده شد. رنگ‌آمیزی رنگ‌آمیزی کبد نشان داد که LNP نشاندار شده با Dil می‌تواند با موفقیت هم سلول‌های کبدی و هم سلول‌های اندوتلیال را ترانسفکشن کند. در داخل بدن

Cas9 و sgRNA LNP موش‌های NSG HemA را قادر می‌سازد تا فعالیت درون‌زای پلاسمایی FVIII را به دست آورند.

mRNA Cas9 کپسوله شده و RNA تک راهنما (sgRNA) LNP ها به صورت داخل وریدی به موش های مبتلا به هموفیلی A (NSG HA) با نقص ایمنی تحویل داده شدند. بیان پایدار FVIII درون زا تا 4 هفته با روش aPTT تایید شد و جهش یافته FVIII به ترتیب با توالی‌یابی DNA و ابزار آنالیز CRISPR آنلاین تأیید شد.

محتوای مرتبط

وبینارهای تعاملی
تصویر

Please enable the javascript to submit this form

با کمک هزینه های آموزشی از Bayer، BioMarin، CSL Behring، Freeline Therapeutics Limited، Pfizer Inc.، Spark Therapeutics، و uniQure, Inc.

SSL ضروری