AAV-i vektorite sisestamise sagedus, asukoht ja olemus pärast FVIII transgeeni pikaajalist jälgimist hemofiilia A-mudelis
Tähtsündmused ISTH 2020 virtuaalkongressilt

AAV-i vektorite sisestamise sagedus, asukoht ja olemus pärast FVIII transgeeni pikaajalist jälgimist hemofiilia A-mudelis

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Klooster Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 ja David Lillicrap1

1Kingstoni ülikooli patoloogia ja molekulaarmeditsiini osakond, Kingston, Ontario, Kanada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, USA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Saksamaa.

3Loomahooldusteenused, Queen's University, Kingston, Ontario, Kanada.

Peamised andmepunktid

Vasakul olev tabel näitab uuringus osalenud 8 koera annust, kapsiidi serotüüpi, FVIII taset ja integreerimiskohtade (IS) arvu. Kümme aastat pärast infusiooni oli kaheksast loomast FVIII tase <2% ja ülejäänud 8 looma puhul oli see vahemikus 1% kuni 2.9%. Integreerimissaite analüüsiti kahel meetodil (märk-rikastamise järjestamine, TES ja lineaarse amplifikatsiooniga vahendatud PCR, LAM-PCR). Parempoolne graafik näitab iga looma IS suhtelist jaotust.

Iga looma 2 maksa saidi genoomset DNA-d analüüsiti vektori ja genoomi integreerimiseks. Integratsioonivormid (vektorgenoom) moodustasid 4.6% ja episomaalsed vormid (vektorvektor) 95.4% loetud lugemistest. Need tulemused näitavad, et ekspressioonivektorid säilitasid episomaalse vormi peamiselt 10 aastat pärast infusiooni.

See tabel näitab TES-meetodil põhinevat 10 levinumat integratsioonisaiti (kromosoom, suurus, geen ja asukoht). Mõlema järjestamismeetodi põhjal leiti kõige tavalisemad integreerimissaidid KCNIP2, CLIC2, ABCB1 ja F8 geenid.

SEOTUD SISU