Σύνοψη και συνέπειες ολοκλήρωσης AAV

Σημαντικά σημεία από το 16ο εργαστήριο του NHF για τις νέες τεχνολογίες και τη μεταφορά γονιδίων για την αιμορροφιλία

Σύνοψη και επιπτώσεις ενσωμάτωσης AAV

Frederic D. Bushman, PhD
Καθηγητής και πρόεδρος
Τμήμα Μικροβιολογίας
Συνδιευθυντής Κέντρου Έρευνας για τους Κορωνοϊούς και Άλλα Αναδυόμενα Παθογόνα
Συνδιευθυντής του προγράμματος μικροβιώματος PennCHOP
Perelman School of Medicine στο Πανεπιστήμιο της Πενσυλβανίας

Βασικά σημεία δεδομένων

Αποτελέσματα

Αξιοσημείωτη κλωνική επέκταση με θέσεις ολοκλήρωσης κοντά σε γονίδια που σχετίζονται με τον καρκίνο

Κλωνικές επεκτάσεις που παρατηρήθηκαν σε 5 από 9 σκύλους αιμορροφιλίας Α στους οποίους έγινε έγχυση φορέα AAV που περιέχει διαγονίδιο παράγοντα VIII (FVIII). Οι κλωνικές επεκτάσεις υποδεικνύονται από το πλησιέστερο αναγνωρισμένο γονίδιο. Μερικές από αυτές τις επεκτάσεις βρέθηκαν κοντά σε γονίδια που σχετίζονται με την ογκογένεση (π.χ., η πράσινη γραμμή στο Linus βρισκόταν κοντά σε γονίδια Διαγραμμένα στη Λευχαιμία 2, DLEU2, και τύπου DLEU2 DLEU2L).

συμπεράσματα

Σταθερός και διατηρημένος FVIII που εκφράστηκε για έως και 10 χρόνια σε σκύλο μοντέλο αιμορροφιλίας Α. Παρατηρήθηκε αύξηση στη δραστηριότητα του FVIII σε 2 από 9 σκύλους.
Παρατηρήθηκε κλωνική επέκταση με ενσωματωμένο AAV DNA κοντά σε γονίδια που σχετίζονται με τον καρκίνο. Άγνωστοι μηχανισμοί πιθανής ενεργοποίησης εισαγωγής.
Κανένας σκύλος δεν είχε ενδείξεις ογκογένεσης ή ηπατικών όζων παρά τους διευρυμένους κλώνους
Δεν είναι σαφές γιατί δύο σκύλοι παρουσίασαν αύξηση στα επίπεδα FVIII, αλλά το απλούστερο μοντέλο μπορεί να είναι ο επεκτεινόμενος κλώνος με άθικτο γονίδιο FVIII, αν και αυτό δεν εντοπίστηκε στη μελέτη
Η μεγάλη πλειονότητα των διαγονιδίων που κωδικοποιούνται από AAV απενεργοποιούνται με μετάλλαξη, προσφέροντας μια ευκαιρία για βελτιστοποίηση