Frekvens, placering og art af AAV-vektorindsættelser efter langvarig opfølgning af FVIII-transgenlevering i en hæmofili En hundemodel
Højdepunkter Fra ISTH 2020 Virtual Congress

Frekvens, placering og art af AAV-vektorindsættelser efter langvarig opfølgning af FVIII-transgenlevering i en hæmofili En hundemodel

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 og David Lillicrap1

1Institut for Patologi og Molekylær Medicin, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

2BioMarin Pharmaceutical, Novato, CA, USA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Tyskland.

3Animal Care Services, Queen's University, Kingston, Ontario, Canada.

Nøgledatapunkter

Tabellen til venstre viser dosis, kapsidserotype, FVIII-niveauer og antal integrationssteder (IS) for de 8 hunde, der er inkluderet i undersøgelsen. Ti år efter infusion var FVIII-niveauer i 2 af de 8 dyr <1% og varierede fra 2.9% til 8.6% hos de andre 6 dyr. Integrationssteder blev analyseret under anvendelse af 2 metoder (målberigende sekventering, TES og lineær amplifikationsmedieret PCR, LAM-PCR). Grafen til højre viser den relative fordeling af IS for hvert dyr.

Genomisk DNA fra 2 leversteder for hvert dyr blev analyseret for vektor-genomintegration. Integrationsformer (vektorgenom) tegnede sig for 4.6%, og episomale former (vektor-vektor) tegnede sig for 95.4% af læsetællingerne. Disse resultater indikerer, at ekspressionsvektorerne opretholdt overvejende en episomal form 10+ år efter infusion.

Denne tabel viser de 10 mest almindelige integrationssteder (kromosom, størrelse, gen og placering) baseret på TES-metoden. Baseret på begge sekventeringsmetoder blev de mest almindelige integrationssteder fundet i nærheden af KCNIP2, CLIC2, ABCB1 og F8 gener.

RETTET INDHOLD