Freqüència, ubicació i naturalesa de les insercions vectorials d'AAV després del seguiment a llarg termini del lliurament transgènic FVIII en hemofília Un model de gos
El més destacat del congrés virtual ISTH 2020

Freqüència, ubicació i naturalesa de les insercions vectorials d'AAV després del seguiment a llarg termini del lliurament transgènic FVIII en hemofília Un model de gos

Paul Batty1, Sylvia Fong2, Matteo Franco3, Irene Gil-Farina3, Aomei Mo1, Lorianne Harpell1, Christine Hough1, David Hurlbut1, Abbey Pender1, Sofia Sardo Infirri1, Andrew Winterborn4, Manfred Schmidt3 i David Lillicrap1

1Departament de Patologia i Medicina Molecular, Queen's University, Kingston, Ontario, Canadà.

2Farmacèutica BioMarin, Novato, Califòrnia, EUA.

3GeneWerk GmbH, Heidelberg, Alemanya.

3Serveis de cura d’animals, Queen’s University, Kingston, Ontario, Canadà.

Punts de dades clau

La taula de l'esquerra mostra la dosi, el serotip de càpsida, els nivells de FVIII i el nombre de llocs d'integració (IS) per als vuit gossos inclosos en l'estudi. Deu anys després de la infusió, els nivells de FVIII en 8 dels vuit animals eren <2% i oscil·laven entre el 8% i el 1% en els altres 2.9 animals. Els llocs d’integració es van analitzar mitjançant 8.6 mètodes (seqüenciació d’enriquiment de dianes, TES i PCR mediada per amplificació lineal, LAM-PCR). El gràfic de la dreta mostra la distribució relativa del SI per a cada animal.

Es va analitzar l'ADN genòmic de 2 llocs hepàtics per a cada animal per a la integració vector-genoma. Les formes d'integració (vector-genoma) van representar el 4.6% i les formes episomals (vector-vector) van representar el 95.4% dels recomptes llegits. Aquests resultats indiquen que els vectors d’expressió mantenien predominantment una forma episomal 10+ anys després de la infusió.

Aquesta taula mostra els deu llocs d’integració més comuns (cromosoma, mida, gen i ubicació) basats en el mètode TES. Basada en ambdós mètodes de seqüenciació, es van trobar els llocs d 'integració més comuns a prop del KCNIP2, CLIC2, ABCB1 i F8 els gens.

CONTINGUT RELACIONAT