Мониторинг на сайтове за векторна интеграция в подходи за генна терапия in vivo чрез секвениране на течна биопсия и интеграция на сайтове

Акценти от 28-ия годишен конгрес на ESGCT

Мониторинг на сайтове за векторна интеграция в подходи за генна терапия in vivo чрез секвениране на течна биопсия и интеграция на сайтове

Д Чезана¹, Калабрия¹, Л Рудилосо¹, P Gallina¹, Г Спиноци¹, А Маняни², М Пузолес³, Ф Фумагали¹, V Калби¹, М. Вицел⁴, Ф. Д. Бушман⁵, Канторе¹, Н Тейлър³, VS Цимерман³, Клайн⁴, Фишер², М Кавацана², Е шест², А Айути¹, Л Налдини¹, Е Монтини¹

¹Институт за генна терапия в Сан Рафаеле (HSR-TIGET)

²Лаборатория по човешка лимфохемапоеза, INSERM, Франция

³Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, Франция

⁴Детска болница д-р фон Хаунер, LMU, Германия

⁵Катедра по микробиология, UPenn, САЩ

Ключови точки от данни

Извличане на IS от безклетъчна ДНК, пречистена от телесни течности
Характеризиране на профила на интеграция на Lentivirus (LV) при хемофилични кучета

Извличане на IS от безклетъчна ДНК, пречистена от телесни течности

Безклетъчна ДНК (cfDNA) се освобождава в кръвта от здрави, възпалени или болни клетки на твърди органи (като черен дроб или тимус), подложени на апоптоза или некроза. Генетичните промени в пречистената cfDNA, включително сайтове за векторно-геномна интеграция (IS) от трансдуцирани клетки, могат да бъдат открити чрез секвениране на място за интегриране на течна биопсия (LiBIS-seq).

Характеризиране на профила на интеграция на Lentivirus (LV) при хемофилични кучета

Три възрастни хемофилни кучета (O21, M57 и O59) получиха еднократна инжекция на LVs, експресиращи различни версии на кучешка коагулация FIX. За всяко куче, cfDNA се пречиства от кръвен серум, събран в 7-8 различни времеви точки, започвайки от 30 до 532 дни след инжектирането. Тази графика показва приблизителния размер на популацията на маркирани клетъчни клонове, допринасящи за споделените IS с течение на времето при кучета M57 и O59.