Вариант на фактор VIII с елиминиране на мястото на N-гликозилиране при 2118 намален анти-FVIII имунен отговор при мишки, лекувани с хемофилия А с генна терапия

Акценти от 25-та годишна среща на ASGCT

Вариант на фактор VIII с елиминиране на мястото на N-гликозилиране при 2118 намален анти-FVIII имунен отговор при мишки, лекувани с хемофилия А с генна терапия

Представено от: Carol H. Miao, MD, Детски изследователски институт в Сиатъл, Сиатъл, Вашингтон, САЩ

Карол Х. Мяо^1,4, Менг-Ни Фан¹, Шуайшуай Уанг², Джунпин Джанг³, Сяохе Цай¹, Тинг-Йен Чао¹, Лей Ли², Weidong Xiao³, Барбара А. Конкъл⁴

¹Детски изследователски институт в Сиатъл, Сиатъл, Вашингтон
²Държавен университет на Джорджия, Атланта, Джорджия
³Университет Индиана, Индианаполис, Индиана
⁴Университет във Вашингтон, Сиатъл, Вашингтон

Ключови точки от данни

Развитие на инхибитор след инфузия на WT-BDD-FVIII и мутирали варианти на FVIII
CD4+Т-клетъчна пролиферация в отговор на припокриващи се манозилирани пептиди

Развитие на инхибитор след инфузия на WT-BDD-FVIII и мутирали варианти на FVIII

Мишките с хемофилия А бяха инжектирани хидродинамично с плазмиди, кодиращи мутирали варианти на FVIII и WT BDD-FVIII, съответно. Втори предизвикателства бяха извършени чрез хидродинамично инжектиране във всички групи на 86-ия ден. (A) От ляво на дясно, дивият тип (WT)-BDD-FVIII плазмиди, използвани за N до Q мутагенеза, получените конструкции на вариант на FVIII, използвани за in vivo генна терапия и относителен отговор на FVIII антитела. (B) FVIII-специфични нива на IgG бяха анализирани чрез ELISA след първото и второто плазмидно предизвикателство. Анти-FVIII имунните отговори са значително намалени при мишки, третирани с плазмида, носещ FVIII N2118Q вариант.

CD4+Т-клетъчна пролиферация в отговор на припокриващи се манозилирани пептиди

(A) Припокриващи се пептиди, заобикалящи N2118 сайта, с дължина 15 аминокиселини, бяха синтезирани с високо манозен гликан Man6GlcNAc2 прикрепвания. (B) Нивата на CD4+ Т-клетъчна пролиферация бяха измерени в отговор на манозилирани пептиди MP1 (ляв панел), MP2 (среден панел) и MP3 (десен панел) и техните негликозилирани аналози (NGP1, NGP2 и NGP3). Данните са представени като средни със стандартно отклонение от три отделни експеримента (**P <0.01, ***P <0.001).