Маніторынг сайтаў вектарнай інтэграцыі ў падыходах да геннай тэрапіі in vivo шляхам секвенавання вадкаснай біяпсіі інтэграцыі сайта

Асноўныя моманты 28-га штогадовага кангрэса ESGCT

Маніторынг сайтаў вектарнай інтэграцыі ў падыходах да геннай тэрапіі in vivo шляхам секвенавання вадкаснай біяпсіі інтэграцыі сайта

Д Чезана¹, Калабрыя¹, Л Рудзіласа¹, П. Галіна¹, Г. Спіноцы¹, Маньяні², М Пузольес³, Ф Фумагалі¹, V Calbi¹, М. Вітцэль⁴, Ф. Д. Бушман⁵, Кантор¹, Н Тэйлар³, В. С. Цымерман³, Кляйн⁴, Фішэр², М. Кавацана², E Шэсць², А Аіуці¹, Л. Налдзіні¹, Э Манціні¹

¹Інстытут геннай тэрапіі Сан-Рафаэле (HSR-TIGET)

²Лабараторыя лімфагематопоэза чалавека, INSERM, Францыя

³Institut de Génétique Moléculaire de Montpellier, CNRS, Францыя

⁴Дзіцячая бальніца доктара фон Хаунэра, LMU, Германія

⁵Дэпартамент мікрабіялогіі, UPenn, ЗША

Асноўныя дадзеныя

Вылучэнне IS з бесклетачнай ДНК, вычышчанай ад вадкасцяў арганізма
Характарыстыка профілю лентивируса (LV) інтэграцыі ў гемафільных сабак

Вылучэнне IS з бесклетачнай ДНК, вычышчанай ад вадкасцяў арганізма

Бесклетачная ДНК (вкДНК) вылучаецца ў кроў са здаровых, запалёных або хворых клетак цвёрдых органаў (напрыклад, печані або вілачкавай залозы), якія падвяргаюцца апоптоз або некрозу. Генетычныя змены ў вычышчанай вкДНК, уключаючы вектар-геномныя сайты інтэграцыі (IS) з трансдуцаваных клетак, можна выявіць шляхам секвенавання сайта інтэграцыі вадкай біяпсіі (LiBIS-seq).

Характарыстыка профілю лентивируса (LV) інтэграцыі ў гемафільных сабак

Тры дарослыя гемафільныя сабакі (O21, M57 і O59) атрымалі адну ін'екцыю LVs, якія выказваюць розныя версіі сабачай каагуляцыі FIX. Для кожнай сабакі вкДНК ачышчалі з сыроваткі крыві, сабранай у 7-8 розных часовых момантаў, пачынаючы з 30 да 532 дзён пасля ін'екцыі. Гэты графік паказвае меркаваны памер папуляцыі адзначаных клонаў клетак, якія ўносяць свой уклад у агульныя IS з цягам часу ў сабак M57 і O59.