إحاطة المؤتمر: تواتر ومكان وطبيعة عمليات إدخال ناقلات AAV بعد المتابعة طويلة الأمد لعامل (FVIII) تسليم الجينات المعدلة وراثيًا في الهيموفيليا نموذج الكلب

النقاط البارزة من المؤتمر الافتراضي ISTH 2020

تواتر وموقع وطبيعة عمليات إدخال ناقلات AAV بعد المتابعة طويلة الأمد للتسليم التحويلي لعامل (FVIII) في الهيموفيليا نموذج الكلب

بول باتي¹، سيلفيا فونغ²ماتيو فرانكو³، ايرين جيل فارينا³اومي مو¹، لوريان هاربيل¹كريستين هوغ¹ديفيد هيرلبوت¹، آبي بندر¹صوفيا ساردو إنفيري¹، أندرو وينتربورن⁴مانفريد شميدت³ وديفيد ليليكراب¹

¹قسم علم الأمراض والطب الجزيئي ، جامعة كوينز ، كينغستون ، أونتاريو ، كندا.

²BioMarin Pharmaceutical ، نوفاتو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية.

³GeneWerk GmbH ، هايدلبرغ ، ألمانيا.

³خدمات رعاية الحيوان ، جامعة كوينز ، كينغستون ، أونتاريو ، كندا.

نقاط البيانات الرئيسية

يوضح الجدول الموجود على اليسار الجرعة والنمط المصلي القفيصة ومستويات العامل الثامن FVIII وعدد مواقع التكامل (IS) للكلاب الثمانية المشمولة في الدراسة. بعد عشر سنوات من التسريب ، كانت مستويات العامل الثامن في 8 من 2 حيوانات أقل من 8٪ وتراوحت من 1٪ إلى 2.9٪ في الحيوانات الستة الأخرى. تم تحليل مواقع التكامل باستخدام طريقتين (تسلسل الإثراء المستهدف ، TES ، والتضخيم الخطي بوساطة PCR ، LAM-PCR). يوضح الرسم البياني الموجود على اليمين التوزيع النسبي لـ IS لكل حيوان.

+

تم تحليل الحمض النووي الجيني من موقعين كبديين لكل حيوان من أجل تكامل الجينوم الناقل. شكلت أشكال التكامل (الجينوم المتجه) 2٪ والأشكال الورمية (ناقل-ناقل) تمثل 4.6٪ من أعداد القراءة. تشير هذه النتائج إلى أن نواقل التعبير حافظت في الغالب على شكل عرضي بعد 95.4+ سنوات من التسريب.

+

يوضح هذا الجدول مواقع التكامل العشرة الأكثر شيوعًا (الكروموسوم والحجم والجين والموقع) بناءً على طريقة TES. استنادًا إلى كلتا طريقتين التسلسل ، تم العثور على مواقع التكامل الأكثر شيوعًا بالقرب من KCNIP2 و CLIC2 و ABCB1 و F8 الجينات.